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不多久后，豆油和水分层，水在下面，豆油在上面，豆油上还飘着一些青霉菌体，水底也沉着牛肉渣等。
夏淮安取来培养皿，先从一个被救出的小孩身上一处腐烂发脓的伤口里，取出一些脓液，涂抹在培养皿中，培养出脓杆菌。然后他再在脓杆菌中，滴入一滴豆油层液体，或是一滴水层液体。
一天后，滴入水层液体的那个培养皿中，以水滴为中心，出现了一个直径一厘米左右的空洞。这个空洞里的脓杆菌，都被杀死了！而滴入豆油层液体的毫无变化！
这个实验让夏淮安确认，青霉素就在水溶层。
掌握了培养方法，又知道青霉素可溶在水层，接下来只需要提纯。
夏淮安使用最基本的提纯方法，首先设计出纯液体培养基，将牛肉膏过滤，只保留清亮的蛋白汤，在加入一点白醋，09的盐，10的蜜糖水和10的米浆。
培养基经过高温消毒，避免杂菌滋生。
将青霉素接种到大玻璃瓶做的培养基中，盖上酒精棉花塞，通气但抑菌，培养七天后，放入两斤豆油。剧烈摇晃后，再静置。
小心的取出下层的水溶液。经过细竹炭粉过滤，然后收集过滤后的溶液。
